[自用习题]3月11日课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（第3课时）

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选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（第3课时）
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一、单选题（每题10分，共100分）
1. 分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（   ）
①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐
A. ①③⑤⑦    B. ①③⑤⑧
C. ②④⑥⑧    D. ①④⑥⑦

2. 下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（  ）
A. 分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氮气
B. 将实验组和对照组平板倒置，25℃恒温培养24～48小时
C. 统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在300以上的平板进行计数
D. 用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红

3.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是(    )
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

4.下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，不正确的是（    ）
A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置
B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数
C.在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同
D.在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染

5.在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出(    )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌
C．分解尿素的细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

6.欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（   ）
A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
B．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌
C．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板
D．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为空白对照

7.下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（   ）

A．3号试管中的菌落稀释倍数为103倍
B．4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号的10倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高

8.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。产生A同学结果的原因可能有（    ）
①土样不同  ②培养基污染  ③操作失误  ④没有设置对照
A.①②③    B.②③④      C.①③④    D.①②③④

9.下列关于微生物的分离和培养的叙述中，正确的是(　　)
A.进行微生物培养前，需对培养瓶进行消毒处理
B.对细菌的分离和计数可用平板划线法和稀释涂布平板法
C.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
D.用含刚果红的尿素培养基筛选鉴别出能分解尿素的菌株

10. 在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结果产生原因可能有（   ）
①土样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照
A.①②③    B. ②③④    C. ①③④    D. ①②④

参考答案和解析

1.【答案】B
【解析】要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，①正确、②错误；分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂，③正确，④错误；培养基中需要加碳源即葡萄糖，⑤正确，⑥错误；不需要氮源，故不加硝酸盐，⑦错误，⑧正确，因此B正确。
2.【答案】D
【解析】分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳，A错误；将实验组和对照组平板倒置，30～37℃恒温培养24～48小时，B错误；统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30～300间的平板进行计数，求其平均值，C错误；用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红，D正确。
3.【答案】A
【解析】酚红指示剂只能用来检测尿素分解菌，故A正确；二苯胺试剂常用来进行DNA的鉴定，故B错误；苏丹Ⅲ试剂可以用来检测脂肪，故C错误；双缩脲试剂可以用来检测蛋白质，故D错误。
4.【答案】C
【解析】 “土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中，经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A正确；同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，并求其平均数，B正确；细菌进行二分裂增殖，不能保证遗传物质平均分配，在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C错误；在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染，D正确。
5.【答案】C
【解析】乳酸菌属于异养厌氧微生物，不能在缺氮培养基上生存；金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，A错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，大肠杆菌不能在添加青霉素的选择培养基上生存，B错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌（如霉菌），加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长可以筛选分离放线菌，C正确；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，D错误。
6.【答案】B
【解析】要土壤中分离出能分解尿素的细菌，可先将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解纤维素的细菌，用加入酚红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌，B错误；同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，计数时取其平均值，C正确；可将未接种的培养基在相同条件下培养作为空白对照，D正确。
7.【答案】B
【解析】3号试管是稀释104倍，A错误；4号中稀释液进行平板培养，稀释倍数比5号的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号的10倍，B正确；5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3×105×10=1.7×108个，C错误；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D错误。
8.【答案】A
【解析】A同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染（培养基灭菌不彻底或操作过程没有保证无菌操作都会导致菌落数偏多），还可能是操作失误，比如培养基的稀释倍数搞错了，或培养基中混入了其他含氮物质等，但与是否设置对照无关，故A项正确，B、C、D项错误。
9.【答案】C
【解析】选项A，应对培养瓶进行灭菌处理。选项B，对细菌进行计数时不能用平板划线法。选项D，用含酚红的尿素培养基筛选和鉴别出分解尿素的菌株。
10.【答案】A
【解析】土样不同可能导致计数偏差，①正确；培养基污染，会导致菌落增多，②正确；操作失误可能增加微生物的数量和种类，菌落会增多，③正确；没有设置对照不会影响菌落数目，④错误。